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Shh whole mount immunohistochemistry

サンプル:マウスE14.5肺 2ml tubeを使用

100%メタノールに回収

  ↓ r.t. 3hr

新しい100%メタノールに交換し -20℃保存
メタノールからPBSに置換

  ↓

2mm角にきざむ

1.5% Normal Rabbit Serum 200μl

  ↓ r.t.1hr 回転振盪

1次抗体 anti- Shh x10 inPBS 200μl

  ↓ 4℃ o/n

Wash PBS

  ↓ r.t. 回転振盪10min x3

2次抗体 anti-goat-Alexa x200 inPBS 200μl

  ↓ 4℃ o/n

Wash PBS

  ↓ r.t. 10min x5遮光

コンフォーカル観察

  ↓

透明化液(Scale)に交換

  ↓ r.t. 4day回転振盪 遮光

コンフォーカル観察

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